Микрофлора рубца высокопродуктивных коров
Высокий уровень молочной продуктивности при одновременном поддержании длительности сроков хозяйственного использования и воспроизводительной функции у коров — одна из актуальнейших задач современного молочного животноводства.
С каждым годом в России увеличивается число хозяйств с высокой продуктивностью молочного стада. При этом для получения высокой молочной продуктивности животных специалисты хозяйств часто включают в рацион большое количество комбикормов и гораздо меньше — объемистых кормов собственной заготовки. Однако данный подход к повышению продуктивности не учитывает физиологических особенностей крупного рогатого скота.
Жвачные животные, благодаря уникальной системе пищеварения и ферментативной деятельности микроорганизмов-сим- бионтов рубца, способны потреблять значительное количество растительных кормов. Когда животным в хозяйствах в рацион вводят большое количество комбикорма, происходит изменение направленности биохимической деятельности преджелудков.
При этом наблюдается повышенный синтез молочной кислоты в рубце, которая образуется при ферментации крахмала комбикорма микроорганизмами, что приводит к снижению pH рубцовой среды. Все это отрицательно влияет, в первую очередь, на микрофлору, переваривающую клетчатку. В результате происходит снижение ферментации клетчатки растительных кормов, образование летучих жирных кислот, жирности молока и потребления грубых кормов. Все это негативно сказывается на здоровье животных.
В связи с этим, важным является исследование влияния рациона дойных коров на состав микрофлоры рубца. Тем не менее, на сегодняшний день изучение анаэробных микроорганизмов рубца — достаточно сложная задача.
Одним из наиболее перспективных на сегодняшний день является T-RFLP-анализ (Terminalrestrictionfragmentlengthpolymorphism) — молекулярно-биологический метод для изучения структуры микробной экосистемы, включающий в себя стадии выделения ДНК из исследуемых образцов, амплификацию генов микроорганизмов, обработку эндонуклеазами рестрикции и разделение фрагментов генов микроорганизмов на секвенаторе.
Для определения состава микроорганизмов в рубце были отобраны пробы рубцового содержимого здоровых коров у ряда хозяйств Ленинградской и Краснодарской областей, рационы которых различались по количеству концентратов и грубых кормов (см. табл.).
Сравнительный анализ микрофлоры рубца всех здоровых и выбракованных коров свидетельствует о существенном нарушении баланса микроорганизмов (бактерий, грибов и архей) в микробном сообществе рубца исследованных нами выбракованных животных.
При этом результаты анализа бактериального сообщества рубца выбракованных животных продемонстрировали низкое содержание целлюлозолитических бактерий семейств Lachnospiraceae и Ruminococcaceae, лактат утилизирующих — семейства Veillonellaceoe, высокий уровень молочнокислых бактерий семейства Lactobacillaceae, ферментирующих моносахара до лактата в рубце, и бактерий рода Fusobacterium.
В результате статистической обработки данных было выявлено 14 доминирующих филотипов бактерий, 3 филотипа архей и 6 филотипов грибов, которые были достоверно связаны с уровнем молочной продуктивности коров.
Кроме того, установлено, что чем выше в рационе было количество комбикорма, тем ниже было в рубце коров содержание- положительно связанных с уровнем молочной продуктивности- филотипов архей и грибов, а также бактериального филотипа 267 п.н. (Megasphaerasp.).
Стоит отметить, что при высоком содержании в рационе дойных коров комбикорма, крахмал, который входит в состав комбикорма, сбраживается до молочной кислоты. Вследствие этого повышается кислотность в рубце, что приводит к угнетению росталактат-утилизирующих (семейства Veillonellaceoe) и целлюлозолитических бактерий (семейств Ruminococcaceae и Lachnospiraceae), которые, как известно, очень чувствительны к подкислению среды. В результате деятельность этих микроорганизмов в рубце нарушается и происходит накопление молочной кислоты.
Ситуация резко ухудшается, если на фоне высокого уровня концентрированных кормов в рационе коровам скармливают кислый силос. Таким образом, запускается каскадный механизм лактатного ацидоза.
В таких условиях в рубце начинает размножаться бактерия Fusobacteriumnecrophorum, использующая лактат в качестве энергетического субстрата, вызывающая некробактериоз. Её проникновение через слизистую в кровь обуславливает дальнейшее инфицирование — абсцессы печени и других внутренних органов, поражения копыт, кожи или слизистых.
Таким образом, результаты наших исследований свидетельствуют, что снижение удоев, заболевание хромотой и бесплодием у выбракованных животных, вероятно, произошло в результате лактатного ацидоза.
Таблица Связь между содержанием филотипов микроорганизмов в рубце и уровнем молочной продуктивности коров
|
||
Микроорганизм
|
Филотипы, положительно связанные с уровнем молочной продуктивности
|
Филотипы, отрицательно связанные с уровнем молочной продуктивности
|
Бактерии
|
256 п.н. (Propionisporahippei)
267 п.н. (Megasphaerasp)
278 п.н. (Butyrivibriofibrisolvens)
|
61 п.н. (Bacteroidess)
87,4 п.н., 88 п.н. (Selenomonassp)
107 п.н., 108 п.н. (Burkholderia sp)
442,8 п.н. (Clostridium sp)
67,4 п.н., 68,4 п.н., 69,6 п.н.
432 п.н. (Uncultured bacteria)
|
Метаногенные археи
|
60 п.н., 202,6 п.н.
|
253,2 п.н.
|
Грибы
|
50,7 п.н., 212,6 п.н., 214,3 п.н.
|
152 п.н., 153,5 п.н., 219 п.н.
|